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在医学临床主要用于治疗高血脂症,防止动脉粥样硬化、脂肪肝。也可用于肉类和水产加工中的嫩化。
酶的最适作用温度为50摄氏度。根据查询相关 *** 息,在硼砂硼酸缓冲液中最适作用pH为810左右,酶在碱性环境下pH710至12稳定性较好。
1、胰蛋白酶活性中心有带负电的天冬氨酸残基,可以结合并切割带正电的精氨酸和组氨酸的羧基端
2、胰凝乳蛋白酶活性中心有小侧链氨基酸残基,可以结合并切割芳香族氨基酸—Trp、Tyr、Phe的羧基端
3、弹性蛋白酶活性中心有相对较大且不带电的缬氨酸和苏氨酸,可以结合并切割甘氨酸和丙氨酸的羧基端
以上蛋白酶切割时,切割位点3'端的氨基酸如果是脯氨酸,都会不同程度上抑制蛋白酶的水解作用(初步估计是脯氨酸结构太大,影响和活性中心的结合)
精浆弹性硬蛋白酶(PMN-Elastase)精浆弹性硬蛋白酶是检测炎症的手段之一,精浆弹性硬蛋白酶可作为静止型生精浆弹性硬蛋白酶检测原理
包被于固相载体的抗弹性硬蛋白酶单抗可与精浆中弹性硬蛋白酶相结合,结合的待测物再与特异性酶标记物反应,最后通过底物显色,其吸光度大小与精浆标本中弹性硬蛋白酶浓度相关。
检测步骤
(1)准备适当数量的包被微孔。标准品、稀释标本加样量均为100μl/孔。五个标准品浓度依次为3000、1500、750、375
和0ng/ml(以标本稀释液作为0
标准)。
(2)用封片膜封板。以孵育振荡器(350
~400rpm)室温(18
~28℃)反应60min。
(3)弃去封板膜。洗板:
以洗涤液注满微孔,每次浸泡1min,共洗板5
次。扣干。
(4)每孔加酶结合物100μl。用封板膜封板。以孵育振荡器(
350
~400rpm)
室温(18
~28℃)反应45min。
(5)弃去封板膜。洗板:以洗涤液注满微孔,每次浸泡1min,
共洗板5
次。扣干。
(6)每孔加显色液100μl,
室温避光反应20min[显色液临用前配制。方法是:显色剂A:
显色剂B按体积比40:
1混合(
如显色剂A
400μl
+
显色剂B
10μl),显色液配制后30min
内使用]。
(7)
每孔加终止液100μl,充分混匀。15min
内上酶标仪双波长450/630nm
比色。
判断标准
判断标准数值:
290ng
/ml,
隐性感染:
290
~1000ng/ml,
确证感染:
1000ng/ml。急性炎症时,
弹性硬蛋白酶复合物浓度迅速从正常水平升高超过290ng/ml,
直到炎症被治愈,
否则还是保持高水平。当临床上检查到有微生物感染,
炎症即可被诊断。殖道感染的诊断及愈后检测指标。临床上主要用于检查男性生殖道感染。
弹性蛋白酶最初以酶原的形式存在,经过酶切后才有活性。
弹性蛋白酶的性状:
1.其外观呈淡 *** 至深 *** 粉末,也可是浅褐至深褐色液体。可溶于水,不溶于乙醇,有吸湿性。
2.纯胰弹性蛋白酶,由240个氨基酸残基组成的单一肽链,相对分子质量约为25000,等电点为9.5。
3.弹性蛋白酶 可使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白消化分解,包括肽键结合的、酰胺结合的和酯结合的进行加水分解。作用的最适pH值7.8,最适作用温度25℃。
4.弹性蛋白酶 具有明显的β-脂蛋白酶作用,能活化磷酯酶A,降低血清胆固醇,改善血清脂质,降低血浆胆固醇及第密度脂蛋白、甘油三酯,升高高密度脂蛋白、阻止脂质向动脉壁沉积和增大动脉的弹性,具有抗动脉粥样硬化及抗脂肪肝作用。
5.弹性蛋白酶最初以酶原的形式存在,经过酶切后才有活性。
弹性蛋白酶(EC
3.4.21.36.):水解酶类的一种,对丙氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸或缬氨酸等含羧基的多肽键起催化水解的作用,因曾认为此酶主要作用于弹性蛋白而有此命名。它是胰以酶原(弹性蛋白酶原)形式分泌的一种丝氨酸蛋白酶,参与肠内蛋白消化。
市面上常见的弹性蛋白酶应该指的是胰弹性蛋白酶(猪胰脏)。从活性中心分类上看,应该是属于丝氨酸蛋白酶。以我查到的资料看,它的结构上一个亚基结合一个Ca离子,应该也属于金属蛋白酶,使用EDTA应该能让它失活。
弹性蛋白酶的介绍就聊到这里吧,感谢你花时间阅读本站内容,更多关于弹性蛋白酶高是为什么、弹性蛋白酶的信息别忘了在本站进行查找喔。
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